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技術(shù)服務(wù)

湖北原位雜交-原位雜交公司-武漢貝科新肽

武漢貝科新肽科技有限公司

  • 主營產(chǎn)品:原位雜交,亞細胞定位,蛋白互作,啟動子篩選
  • 公司地址:湖北省武漢市洪山區(qū)關(guān)山大道289號紫菘逸景華庭二期109棟2層2002-3號
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 組織原位雜交(Tissue in situ hybridization),即原位雜交組織化學技術(shù)和原位雜交細胞化學技術(shù)

  原位雜交技術(shù)的基本原理

  利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序,通過堿基對之間非共價鍵的形成,出現(xiàn)穩(wěn)定的雙鏈區(qū),形成雜交的雙鏈。

  1.兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,通過氫鍵結(jié)合,形成DNA-DNA、DNA一RNA或RNA一RNA雙鍵分子

  2.應用帶有標記的(有性同位素,如3H、35S、32P,熒光素、生物素、等非性物質(zhì))DNA或RNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內(nèi)待測核酸(RNA或DNA)片段進行雜交

  3.用自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的mRNA或DNA的存在與定位

  用原位雜交術(shù),可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質(zhì)的基因表達。

  此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水來探討細胞的功能表達及其調(diào)節(jié)機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。











①細胞特異性mRNA轉(zhuǎn)錄的定位,可用于基因圖譜,基因表達和基因組進化的研究;②組織中病毒DNA/RNA的檢測和定位,如EB病毒mRNA、人類狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測;③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉(zhuǎn)錄水平的表達及其變化的檢測;④基因在染色體上的定位;⑤檢測染色體的變化,如染色體數(shù)量異常和染色體易位等;⑥分裂間期細胞遺傳學的研究,如遺傳病的產(chǎn)前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定,某些的診斷和生物學劑量測定等。



熒光原位雜交(FISH)技術(shù)具有以下優(yōu)點:

高特異性:熒光探針的合成是定向的,保證了雜交過程的特異性,可以有效地降低非特異性雜交和背景干擾。

高靈敏度:熒光信號的檢測比性信號的檢測更靈敏,可以檢測出低拷貝數(shù)的DNA序列,甚至可以檢測單個基因序列。

快速簡便:FISH技術(shù)操作簡便,雜交過程可以在數(shù)小時或數(shù)天內(nèi)完成,而且不需要過于復雜的設(shè)備,便于在實驗室開展。



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